La méthode QuEChERS : protocole et mise en application

La méthode QuEChERS est une méthode de préparation des échantillons particulièrement adaptée à l’analyse des pesticides ou des résidus de médicament présents dans l’alimentation. QuEChERS est l’acronyme de Quick (rapide), Easy (facile), Cheap (bon marché), Effective (efficace), Rugged (robuste) et Safe (sûre).

Plusieurs méthodes sont disponibles en fonction des échantillons étudiés. Il faudra notamment prendre ne compte :

  • La teneur en eau des aliments : l’analyse de fruits secs par exemple nécessitera un petit ajout d’eau
  • La présence de pigments tels que les chlorophylles et les caroténoïdes qui peuvent interférer avec les analytes

La méthode comprend deux étapes :

  • Une étape d’extraction à l’acétonitrile en présence de sels et de tampons pour favoriser l’extraction liquide-liquide
  • Une seconde étape de purification sur phase solide en mode dispersif : comme pour une SPE classique, de la phase stationnaire est ajoutée à l’échantillon pour éliminer les composés qui ne présentent pas d’intérêt pour l’analyse.
Entre chaque étape, les échantillons sont centrifugés pour ne conserver que le surnageant.
Deux modes opératoires sont couramment utilisés selon la nature du tampon :
  • La méthode américaine (et officielle) AOC 2007.01 : avec un tampon acétate
  • La méthode européenne EN 15662 avec l’emploi d’un tampon citrate
Quel que soit l’option choisie, les kits se composent de tubes déjà remplis avec les sels, les tampons et les supports de la SPE.
Les kits contiennent les adsorbants ci-dessous :
  • Du sulfate de magnésium anhydre qui permet de retirer l’eau de l’échantillon. Il engendre également une meilleure homogénéisation de l’échantillon.
  • De la silice greffée PSA (Primary Secondary Amine) destinée à éliminer les pigments polaires, les composés acides, les sucres et les acides gras.
On peut également trouver :
  • De la silice greffée en C18 pour l’élimination des lipides et des stérols
  • Du graphite (carbone) pour retenir les caroténoïdes, les chlorophylles et les molécules de géométrie plane.

La méthode AOC 2007.01

L’extraction

  1. Broyer et homogénéiser l’échantillon avec un blender ou un appareil équivalent
  2. Peser 15 g d’échantillon homogénéisé dans un tube à centrifuger de 50 mL du kit QuEChERS
  3. Ajouter 15 millilitre d’acétonitrile acidifié à 1% avec de l’acide acétique
  4. Ajouter les sels (6 g MgSO4 anhydre et 1,5 g d’Acétate de sodium).
  5. Ajouter l’étalon interne
  6. Agiter manuellement pendant 1 minute
  7. Centrifuger 5 minutes à 4000 tours par minute

La purification

  1. Récupérer 1 à 8 mL de surnageant du tube précédemment centrifugé
  2. Placer le surnageant dans un tube à centrifuger contenant 150 mg MgSO4 anhydre et 50 mg PSA par millilitre de surnageant prélevé
  3. Agiter manuellement pendant 1 minute
  4. Centrifuger 5 minutes à 4000 tours par minute
  5. Transférer le surnageant dans un vial pour l’analyse
Méthode QuEChERS
Etape de centrifugation dans la méthode QuEChERS

La méthode EN 15662

L’extraction

  1. Broyer et homogénéiser l’échantillon avec un blender ou un appareil équivalent
  2. Peser 10 g d’échantillon homogénéisé dans un tube à centrifuger de 50 mL du kit QuEChERS
  3. Ajouter 10 millilitre d’acétonitrile
  4. Ajouter les sels (4 g MgSO4 anhydre,1 g NaCl, 1 g Citrate de sodium dihydraté C6H5O7Na3 et 0,5 g de citrate de sodium dibasique sesquihydrate C6H6Na2O7 · 1.5H2O ).
  5. Ajouter l’étalon interne
  6. Agiter manuellement pendant 1 minute
  7. Centrifuger 5 minutes à 4000 tours par minute

La purification

  1. Récupérer 1 à 6 mL de surnageant du tube précédemment centrifugé
  2. Placer le surnageant dans un tube à centrifuger contenant 150 mg MgSO4 anhydre et 25 mg PSA par millilitre de surnageant prélevé
  3. Agiter manuellement pendant 30 secondes
  4. Centrifuger 5 minutes à 4000 tours par minute
  5. Transférer le surnageant dans un vial pour l’analyse