Point isobestique en spectroscopie

Dans les dosages par spectrophotométrie UV, lorsque l'on dose une espèce A susceptible de se transformer en une espèce B (dosage d'un acide faible par une base forte par exemple), on obtient un spectre du mélange A + B présentant un point commun pour différentes concentration en A et B. Ce point est appelé point isobestique. Les coefficients d'absorption molaire de A et B sont égaux et valent e_iso pour la longueur d'onde l_iso.

L'absorbance en tout point du spectre vaut A= e_AlC_A + e_BlC_B or au point d'isobestique on a
e_iso = e_A = e_B d'où A= e_iso l(C_A+C_B).

L'absorbance du mélange de A et B reste constante si la concentration totale C_A+C_B est constante. Les proportions de A et de B sont indépendantes de l'absorbance.
Conclusion: au point isobestique, l'absorbance reste constante quelque soient les proportions en A et B si leur concentration totale reste constante. Cette propriété est utilisé pour l'étalonnage des spectromètres UV.